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蛋白纯化攻略 | GST标签蛋白纯化
2023/5/15 10:14:16

在蛋白纯化实验的过程中,保证蛋白样品的纯度和质量是关键,为了促进蛋白的可溶性,会使用不同的标签,除了常用的His标签,GST标签也是纯化实验中的明星标签。


关于GST标签蛋白及纯化

GST标签是一种亲和标签,能特异的与谷胱甘肽结合,表现为酶和底物的作用原理,利用这个原理将GST做成标签表达出融合蛋白,与带谷胱甘肽的亲和介质特异性结合纯化出目的蛋白,再用特异性的酶将GST标签切除,从而得到天然蛋白。


GST融合蛋白纯化具有纯度高、纯化条件温和、蛋白活性不受影响以及促进蛋白的可溶性表达等优势。因此,在蛋白研究中,想获得高可溶性蛋白,可优先考虑GST融合表达系统。


GST标签蛋白纯化方案

无论是大肠杆菌或者其他宿主细胞中,天然表达的还是重组表达的,各种来源的GST标签蛋白,都可以用固定的谷胱甘肽亲和层析法纯化,然后用过量的还原性谷胱甘肽竞争洗脱。使用以琼脂糖凝胶为基质的 GST Chromrose 4FF 介质,可以在相对较高流速的情况下,实现对目的蛋白的纯化。此介质通过标签与配体结合,缓冲液洗脱去除杂质,然后标签蛋白在温和且非变性的条件下被洗脱,使得蛋白的抗原性能和功能得以保护。

GST.jpg

产品测试

层析介质:GST Chromrose 4FF

样 品:带 GST 标签的某融合蛋白

实验设备:5mL Xtrap GST 4FF 预装柱、蛋白纯化仪

平衡液/洗杂液:140mM NaCl,2.7mM KCl,10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4,pH 7.4

洗脱液:140mM NaCl,2.7mM KCl,10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4,10mM还原型谷胱甘肽,pH 7.4 (现配现用)

测试对比图.jpg

微信截图_20230512144341.png

测试结1.png

说明:

? 1、3、4、5 是其他公司 GST 标签蛋白纯化填料

? 2 是科诺赛生物的 GST Chromrose?4FF 

从测试结果看, 在相同的实验条件下,科诺赛生物的 GST Chromrose 4FF 产品载量表现较为突出。


产品介绍

GST Chromrose 4FF 是以高度交联的琼脂糖凝胶为基质的亲和层析介质,操作条件温和、特性性强,可以一步纯化各种表达系统表达的谷胱甘肤-S -转移酶、谷胱甘依赖性蛋白和谷胱甘肤转移酶的重组衍生物。

参数.png
订货信息.png


电 话:0532-55679191(工作时间8:30-17:30)

邮 箱:marketing@chromsep.cn

研发中心:山东青岛市高新区锦汇路1号蓝湾创业园A3栋6层

生产基地:山东日照市经济技术开发区深圳路厦门路001号

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