有着先锋免疫作用的IgM抗体，广泛应用于疾病感染的预防、早期诊断及治疗。然而，获得高纯度的IgM抗体是我们必须要解决的首要问题。具有大孔优势的层析介质对于纯化有着“巨球蛋白”称号的IgM，是个值得尝试的选择。

 巨球蛋白IgM的独到之处

免疫球蛋白根据其重链的抗原性不同，分为五类：IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。其中IgM是迄今为止，实际发现的在人体循环系统中最大的抗体，通常以五聚体或六聚体的形式存在，分子量分别约为900 kDa或1050 kDa，其优点如下：

》由于IgM抗体存在于血液和淋巴液中，通常是感染后首先出现的第一抗体，IgM抗体生成后可以起到先锋免疫作用，同时可以激活补体和提高自身免疫调理，对于清除体内的病毒和微生物也有一定作用。

》相比IgG的2个臂，IgM有10个臂可与靶抗原结合，具有更高的亲和力。

》相关资料显示，在诊断自身免疫疾病和某些癌症方面，IgM可能比IgG更有效，国外已有公司专门致力于将IgG转化为IgM结构以提高亲和力以创造出双特性抗体的研究。

IgM纯化有难度

IgM抗体在纯化方面较成熟的IgG抗体有一定的难度。

对于抗体纯化，亲和层析是最好的纯化方法，但是，人IgM可以采用具有广谱Ig结合能力的Protein L，而其他种属来源的IgM，与Protein L没有结合位点，商品化少且成本高。

目前市场上已有的纯化方法包括酸铵沉淀、凝胶过滤、亲和层析、离子交换等，这些方法大都采用普通的层析介质，或多或少都会有一些局限性。由于IgM分子量巨大，普通的琼脂糖微球和聚合物微球孔径较小，抗体不能进入微球孔道内部导致结合载量极其低，同时狭窄的孔径会导致抗体以扩散的方式通过，穿质速率慢，处理量低，分离时间长，不易维持IgM的稳定性，而且普通的琼脂糖微球和聚合物微球耐压性有限，不利于装出高柱效。

由此可见，在纯化IgM的工艺上需要有更全面的考量。

IgM纯化不再难

能够解决难点、痛点的产品，才是市场最大的需求。科诺赛聚焦当前IgM纯化的难点痛点，不断地探索，结合自有的超大孔技术，独辟蹊径，推出了高效的IgM纯化解决方案。

方案一、亲和法

第①步 亲和层析纯化：

使用Protein L Sup-porousd超大孔亲和层析介质，捕获IgM。

第②步 离子交换层析纯化：

使用MoSphere? 50V Q超大孔阴离子交换层析介质，吸附IgM，去除痕量杂质。

方案二、排阻法

第①步 复合模式层析纯化：

使用AdMix Chromrose? FF（阴离子交换与疏水双重功能）复合模式层析介质，吸附宿主细胞杂质，IgM分子量大，排阻在外直接流穿。

第②步 离子交换层析纯化：

使用MoSphere? 50V Q超大孔阴离子交换层析介质，吸附IgM。

当然，IgM抗体纯化的方案不只以上这两种，下游纯化是一个错综复杂的过程，因地制宜的根据发酵液情况调整纯化方案是最明智的选择。亲和法和排阻法适用于重组表达的IgM抗体，对于腹水和血清抗体，由于其抗体亚型较多，则需要针对性地设计纯化方案。相对于进口的标准化产品，科诺赛更倾向于灵活的根据市场需求，定制客户需要的产品和方案。

不同应用场景的多孔径设计

层析介质的配基与目标物的作用基本发生在层析介质颗粒内部，精确的孔径设计对纯化至关重要。科诺赛根据客户不同的应用场景，开发出不同粒径、孔径大小的大孔聚合物离子交换层析介质，满足用户的应用需求。

科诺赛大孔离子交换层析介质的优势：

》蛋白活性高：

超大孔径的设计可明显减弱蛋白质的去折叠程度，提高了蛋白活性；

》非特异性吸附低：

微球表面进行亲水化改性后键合离子交换基团，非特异性吸附低，机械化程度高；

》高流速、高载量：

超大孔径通透性更好，分子传质速度快，可在高流速状态下保持更高的载量，载量提高10倍以上；

》高稳定、高回收率：

超大孔径显著提高生物分子在层析介质上吸附的热稳定性，具有更高的收率。

后发先至，国内唯一

进口品牌垄断层析填料市场几十年，是疫情给了国产品牌一个机会。科诺赛在疫情最肆虐的时候诞生，团队成员没有“海归博士”，没有“美国绿卡”，也没有“欧美永久居留权”，是地道的“土鳖”团队。这个“土鳖”团队基于对产业的热情、对市场的深度理解，从“做别人有的产品”开始，深度发掘市场需求，根据市场需求逐渐“做别人没有的产品”。

质粒、AAV病毒载体、LV病毒载体、溶瘤病毒、流感病毒、IgM抗体、IgA抗体、mRNA疫苗、多糖结合疫苗等生物分子由于其体量巨大至今没有很好的纯化方案。科诺赛团队针对这个市场痛点，开发出了新型的超大孔层析介质。

超大孔制球技术早有科学家建立了理论基础，但是因为“孔大易碎球”的原因一直没有商业化生产。

科诺赛生物自成立以来，一直秉持“以客户为中心，以市场为导向”的研发服务方针，针对客户在纯化阶段的难点痛点，不断地寻找最佳的解决方案，通过近三年来的不懈努力，刻苦攻关，千锤百炼，不断打磨，终于突破技术瓶颈获得成功，是目前国内唯一掌握超大孔制球技术并实践成功的企业。

下一步，科诺赛将利用超大孔技术继续研发超大孔亲和产品，mRNA亲和、质粒亲和、AAV亲和、外泌体亲和，不断补足国内层析的短板，做市场需要的产品，更好地满足国内生物药企的纯化需求。